深圳标准级血清

细胞培养中出现黑点是污染吗？如何处理？一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：细胞生长过老，破碎的细胞残骸；血清质量不好，反复冻融的结果；配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年。深圳标准级血清

如何避免血清中产生沉淀？按如下操作可避免沉淀的产生：解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。深圳标准级血清一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌，如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤。

购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。

热灭活：一般是以56℃，30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示，经过正确处理的热灭清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会明显的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是 "小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。血清的保存应该注意：需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。

多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下，热灭活并不会改善细胞的生长，却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下，其促进的比率也是微不足道的。另外，血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染，从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中，通过加热灭活掉血清中的补体，以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中，由于胎龄原因，尚未形成完整的补体系统，因此，胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且，热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减，进而影响细胞培养效果。每100ml人血清含有蛋白质6-8g，其中主要是白蛋白和球蛋白。泰州去外泌体胎牛血清哪家好

血清对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶。深圳标准级血清

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5（EU/ml）；牛腹泻病毒：阴性；大肠杆菌噬菌体：阴性；支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)　生长曲线（接种浓度）较为大增殖浓度≥2.5×106 个/ml；细胞倍增时间 ≤15h；克隆率 ≥85%。深圳标准级血清