如何挑选适合细胞生长的血清?原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用所用特级胎牛血清,或胚胎干细胞所用胎牛血清。由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。如何正确保存血清:需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。黄石OriCell胎牛血清厂家
血清的保存应该注意:血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理,显微镜下"小黑点"。经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染,一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。南京去外泌体血清多少钱胎牛血清常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。
胎牛血清是细胞培养重要的培养基且不可替代,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养。因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到较为大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:正确储存,避免反复冻融:血清在-20°C冻存。血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。黄石OriCell胎牛血清厂家
血清的主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。黄石OriCell胎牛血清厂家
为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。黄石OriCell胎牛血清厂家
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...