老挝初冬季节非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，不同非洲猪瘟毒株有不同的流行特点。野毒株流行特点：高度接触传播，死亡快，死亡率达30-100%，供料不食，死亡，流产，皮肤发红、黄、白，血便等临床症状；唾液，血液拭子均能检测到抗原（P72荧光定量PCR）；抗体检测早12天可以检测到，30天左右阳性达高峰，可持续5-8个月；变异毒株流行特点：接触传播、有限空气传播，死亡慢，死亡率0-50%，厌食、死亡、关节肿、皮肤坏死等症状，临床症状不明显；间断性排毒，拭子抗原难以检测到(需要P72/MGF/CD2V三重荧光定量PCR)；抗体检测21天可检测到，45-50天左右阳性率达高峰；持续2个月或更短；潜伏+应激可导致爆发；可以通过模糊拔牙、净化种猪、稳定商品猪生产；八方同创提醒病毒主要侵害猪的单核巨噬细胞、树突细胞。老挝初冬季节非洲猪瘟养殖技术要点

非洲猪瘟病毒主要靶向巨噬细胞，并引起严重的免疫病理性细胞因子风暴，这与出血相关并导致严重的免疫失败后果。诱导这种先天免疫反应的机制尚不清楚，考虑到病毒有效关闭巨噬细胞细胞因子和干扰素反应的能力，这一点令人困惑。虽然其中一些反应是致病性的，但基本知识是早期先天免疫反应对于触发适应性免疫是必需的。例如，在免疫反应的先天阶段检测到早期干扰素α（IFN-α）和白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1RA）与改善的结局相关。

总体而言，我们对先天免疫反应的诱导以及导致致命疾病或保护性免疫反应的转换机制的理解存在差距。从非洲猪瘟康复的动物完全排清病毒，并发展出对相似毒株甚至某些情况下对异源病毒攻毒的保护(Boinas,Hutchings,etal.2004;Burmakinaetal.2016;K.Kingetal.2011）。虽然这清楚地证明了适应性免疫的发展，但关于保护相关物和保护机制的信息非常不完整(Bosch-Camós,Lopez,andRodriguez2020;Carlson,O’Donnell,etal.2016)。文献中描述了大量病毒蛋白以及许多抗体和T细胞的病毒靶标，但尚未鉴定出完全保护的B细胞抗原或表位，已测试的T细胞表位在一些研究中介导部分保护。 老挝母育猪非洲猪瘟病毒八方同创总结非洲猪瘟病毒拥有复杂结构，外部有囊膜包裹，病毒基因组庞大，变异能力强，有24个基因型。

非洲猪瘟病毒的复制主要发生在侵入的单核细胞和巨噬细胞的细胞质中，尽管早期复制阶段也在细胞核中被描述。病毒进入通过网格蛋白介导的、发动蛋白依赖性的内吞作用和巨胞饮作用(Galindoetal.2015;HernaezandAlonso2010;Sánchez,Quintas,etal.2012)。肌动蛋白依赖性内吞作用和涉及微管活性的内吞流也参与其中，表明存在经典吞噬作用(Bastaetal.2010)。细胞受体及其病毒配体的身份仍未知。CD163曾被提议为推定受体(Lithgowetal.2014;Sánchez-Torresetal.2003)，但CD163基因敲除猪对非洲猪瘟病毒仍完全易感(Popescuetal.2017)。

非洲猪瘟病毒在地方性流行区，可能存在自然减毒的病毒毒株，表现为年龄依赖性的急性、一过性或亚急性经过。同样，初始体征是发热及相关活动减少和采食量下降。怀孕母猪也可能流产。然而，相当一部分动物会完全康复，并且在大多数情况下，随着时间的推移病毒会完全消失。幼龄发病猪临床症状持续 1-2 周，变得较轻，病死率在10%到60%之间。在某些情况下，成年动物受影响更严重且更致命。在这方面，非洲猪瘟不同于猪瘟，当涉及中等毒力毒株时，猪瘟在年幼动物中更严重。有的研究也描述了非洲猪瘟的慢性形式，特别是在西班牙和葡萄牙使用活疫苗后(Petisca1965)。除了临床症状较轻外，慢性型猪可能有关节肿胀、溃疡和皮肤病变。慢性型具有潜在危险性，因为动物在临床症状消失后仍具有传染性。在撒丁岛，存活动物被描述为具有非洲猪瘟病毒特异性抗体、间歇病毒血症或亚急性疾病，以及具有非特异性临床症状或无症状的存活者。在俄罗斯联邦的田间条件下(Mur,Igolkin,etal.2016)以及用东欧分离株接种的实验动物中(Gallardo,Soler,Rodze,etal.2019)也观察到了类似情况。非洲猪瘟弱毒株以基因2型的MGF和DC2V基因缺失毒株、基因I型毒株、基因I/II重组毒株为主。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 八方同创总结：非洲猪瘟康复猪可能长期带毒，成为潜在传染源，尤其是非洲猪瘟弱毒株，在应激下，重新排毒。楼房养猪非洲猪瘟无害化处理方法

八方同创提醒：非洲猪瘟病毒可利用气溶胶、灰尘等载体，通过大风短距离传播。老挝初冬季节非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟病毒具有较强的酸碱耐受性。研究表明，病毒有较宽的pH值适应范围，在pH值为3.9~13.4（在含有血清的培养基中）时可稳定存活7d以上。一些强抵抗性毒株甚至在pH值为3.1时还能存活，直到pH值下降到2.7时才失去活性。pH值达到13.4时强抵抗性毒株仍可以在无血清培养基中存活20~22h，在25%血清中存活7d。研究表明，ASFV在环境中存在至少3种不同的循环模式：丛林传播循环、蜱-猪循环和家猪（猪-猪）循环。目前，我国仍主要关注家猪循环。ASFV传播途径分为直接和间接接触传播，直接接触传播主要由猪通过口、鼻接触而传播；间接接触传播是由被污染病毒的泔水、工具、设备、物资、饲料、环境等传播，还可经由软蜱、蚊、蝇等叮咬猪后携带病毒。老挝初冬季节非洲猪瘟养殖技术要点

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