l. Nicotiana tabacum seed endophytic communities share a commoncore structure and genotype-specific signatures in diverging cultivars【J】.Computational and Structural Biotechnology Journal, 2020, 18。本发明属于核酸提取纯化技术领域,具体涉及一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法。 背景技术: 二氧化硅能在盐和特定pH值条件下可逆的结合DNA,这也是硅珠法、磁珠法、硅胶膜法提取DNA的理论基础;在高浓度离液盐和低pH值条件下,二氧化硅能通过氢键与DNA结合,而蛋白质、脂类、糖类等杂质因不能被结合从而被去除,去除离液盐、提高pH值之后,DNA与二氧化硅之间的相互作用力减弱,DNA从二氧化硅表面释放,从而获得纯化的DNA;土壤DNA提取零售多少钱呢?虹口区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取
调节样本的含水量等因素来优化裂解条件·裂解不充分:增加物理破碎的时间和次数。·检查洗涤液中是否加入乙醇。·洗脱不充分:建议二次洗脱增加产量或提高洗脱体积。问题3:提取的DNA无法扩增怎么办?解决思路:· 检测DNA的浓度:过量的DNA模板也会抑制PCR反应。·样本DNA稀释之后可以扩增:样本中的腐殖酸等抑制物含量高。·确定PCR反应条件是否已优化:退火温度,时间,引物等等。·非特异条带:洗脱液中目的DNA的丰度可能比较低虹口区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取MP土壤DNA提取询价公司电话。
PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中,
游实验。产品特点:1、适用于不同类型土壤及其他环境样品。2、不受腐殖质干扰。3、30min-60min内即可获得高产量的DNA。4、DNA纯度高,并直接用于下游实验。5、不含有毒有害的试剂成分。案例研究:材料准备:1.西红柿栽盆2.淤泥3.沙土4.松树下5.棕榈树下6.花园7.尼罗河百合花栽盆8.草坪9.柠檬树下10.鳄梨树。实验结果:500mg样本经过试剂盒提取的总DNA在1.2%琼脂糖凝胶电泳(0.5×TAE)。通过琼脂糖凝胶图中我们可以看出,不论是哪种上海益启生物土壤DNA提取订购方便。
磨介质Lysing Matrix E,含有三种不同材质和直径的研磨珠,能有效裂解难以破碎的革兰氏阳性菌、***等微生物;√ 配备对核酸高特异性的结合磁珠,减少对杂质的吸附,提高核酸吸附载量;√ 采用独特的抑制物去除技术,使用去杂剂*需一步去除蛋白、多糖、胆汁盐等杂质;明显提高提取DNA的A260/A230比值。产品特点:浓:FastPrep"仪器搭配研磨珠技术,保证提取浓度高。纯:独特的抑制物去除技术,提高A260/A230,保障提取纯度好提取的DNA可土壤DNA提取上海授权代理商——上海益启生物科技有限公司。虹口区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取
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取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;虹口区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取