冷冻电子显微镜技术步骤之样品制备：用于冷冻电镜研究的生物样品必须非常纯净。生物样品是在高真空的条件下成像的，所以样品的制备既要能够保持本身的结构又能抗脱水、电子辐射。现在普遍采用的方法是通过快速冷冻使含水样品中的水处于玻璃态，也就是在亲水的支持膜上将含水样品包埋在一层较样品略高的薄冰内。冰的结构多种多样，包括六角形冰、立方体冰等，其物理状...

  如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?未拆封的血清，一般情况下应存放于-10℃至-20℃，在产品规定的效期内均可使用，若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内，再放回冷冻。将血清从冷冻冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融，或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。完...

  胎牛血清的处理方法主要有以下几种：1.活性炭处理，活性炭可以与亲脂性分子结合，因此已用于从FBS中去除Hormone，例如雄雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)。这些血清脂质Hormone倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。2.透析，透析可以从FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。这包括极...

  冷冻电镜技术揭示生物分子细节：冷冻电镜可以通过揭示细胞里发生的生命过程细节，帮助人们了解很多有意思的生物学现象。比如，我们吃辣椒会觉得辣，是因为辣椒里有一种叫做辣椒素的小分子。辣椒素与位于舌头神经末梢的膜蛋白TPRV1结合，打开膜蛋白上的一个通道，让细胞膜外面的离子向细胞膜内部流动，这样微小的流动产生的电流通过神经纤维较终传递到我们的大脑...

  全细胞膜片钳模式下有电压钳记录和电流钳记录两种。电压钳记录的原理与电压钳技术相似，但有所不同：首先，全细胞电压钳记录只使用单根电极，但在电学效果上同时实现了电压钳制和电流记录。其次，电压钳记录的电极不细胞，对细胞造成的损伤较小，因而能用于小细胞如神经元的研究。电流钳记录则是通过钳制电极电流来测量膜电位。电流钳在本质上也是电压钳位，它将差分...

  聚合酶链反应：多重连接依赖探针扩增（MLPA):允许用单个引物对扩增多个靶标，从而避免多重PCR的分辨率限制。多重聚合酶链反应:由单个PCR混合物中的多个引物组组成，以产生对不同DNA序列特异的不同大小的扩增子。通过同时靶向多个基因，可以从单次测试中获得额外的信息，否则将需要几次试剂和更多时间来执行。每个引物组的退火温度必须优化，以在单个...

  在体光纤成像记录荧光素酶的每个催化反应只产生一个光 子 , 通常肉眼无法直接观察到, 而且光子在强散射性的生物组织中传输时, 将会发生吸收、 散射、 反射、 透射等大量光学行为 。 因此，必须采用高 灵敏度的光学检测仪器（ 如CCD camera）采集并定量检测生物体内所发射的光子数量, 然后将其转换成图像， 在体生物发光成像中的发光光谱...

  序列标签站点是一个过程，其中PCR被用作基因组的特定片段存在于特定克隆中的指示物。人类基因组计划发现这一应用对于绘制他们测序的粘粒克隆以及协调不同实验室的结果至关重要。聚合酶链反应的一个令人兴奋的应用是对来自远古来源的DNA进行系统进化分析，例如在尼安德特人的复原骨骼中、从猛犸的冷冻组织中或从埃及木乃伊的大脑中发现的DNA已经被放大和测序...

  如何解冻血清？血清解冻需采用逐步解冻法：将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解，然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻，这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗？血清在ISO13485认证的厂房中生产，经过3次0....

  膜片钳技术本质上也属于电压钳范畴，两者的区别关键在于：①膜电位固定的方法不同；②电位固定的细胞膜面积不同，进而所研究的离子通道数目不同。电压钳技术主要是通过保持细胞跨膜电位不变，并迅速控制其数值，以观察在不同膜电位条件下膜电流情况。因此只能用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道活动。目前电压钳主要用于巨大细胞的全性能电流的研究，特...